产品描述

       Minnebio™超活核酸酶(≥99%) (Minnebio™  Ultra-active Nuclease, ≥99%) 是一种来源于粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)的非特异性核酸内切酶，经基因工程改造在 Escherichia coli (E. coli)中表达，通过专利纯化过程，在GMP规范下制备超纯级广谱核酸酶。它可在链内任意核苷酸间进行切割，将核酸完全消化成3至5个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸，能够在非常广泛的条件下 (6 M urea,0.1 M Guanidine HCl,0.4% Triton X-100,0.1% SDS,1 mM EDTA,1 mM PMSF) 降解各种形式的 (双链、单链、线状、环状、天然或变性) DNA和RNA，广泛用于去除生物制品中的核酸。                                            

       本品经基因工程改造在Escherichia coli (E. coli)中表达纯化，纯度≥ 99%。不仅可在科学研究中降低细胞上清和细胞裂解液的粘度，提高蛋白纯化效率及功能研究；还可以应用在基因治疗、病毒纯化、疫苗生产、蛋白和多糖类制药工业作为宿主残留核酸去除试剂。

酶活单位

       适量酶和底物经过30分钟培育后导致紫外光在260 nm波长处吸收△A260改变量为1.0时所需酶的量（对应于消化37μgDNA的量）被定义为一个酶活性单位。

运输与保存方法

       本产品性质及其稳定，保质期较长。可在-20℃的含防止冷冻的溶液50%甘油中保存几个月，冻干粉可在-20℃下保存1年或80℃下保存数年。

产品应用

       本产品用途广泛，常用于重组蛋白、病毒疫苗等生物制品中去除核酸，符合FDA关于核酸污染的处理规程

       本产品可以与多种细胞细菌裂解液配合使用,去除粗提物中的核酸，降低溶液粘性，提高蛋白质产量

       用于生物分析的样品制备包括质谱、HPLC、ELISA、二维蛋白质电泳和印迹分析等。

       可以有效防止细胞治疗和疫苗研究中人外周血单核细胞 (PBMC) 的结团。     

       超活核酸酶可用于代替样品超声处理或其他机械剪切方法处理DNA。

1、超活核酸酶可用于处理细胞或组织的提取液,以降解生物样品中的DNA和RNA，应用在病毒纯化、疫苗生产、蛋白和多糖类制药工业作为宿主残留核酸去除试剂，将宿主残留核酸降 至皮克(pg)级别从而提高生物制品功效和安全性                                             

2、在实验室环境下或者工业制造过程中,本品用于断裂DNA链,以减少由核酸特别是分子量较大的核酸分子导致的比较大的溶液粘度。该酶与 BacReady- Protein Extraction Solution 和 RIPA LysisBuffer等蛋白抽提试剂配合使用，从而消除粗提物中的核酸，降低粘度。                                                          

3、超活核酸酶可用于处理细胞或组织的提取液,以降解生物样品中的DNA和RNA,从而进一步消除它们对样品分析造成的干扰,确保生物分析过程中的灵敏度和准确性。 用于生物分析的样品制备包括质谱、HPLC、ELISA、二维蛋白质电泳和印迹分析等。提高分辨率的分离和提高样品的回收率。例如：T细胞反应试验需要新鲜分离的细胞来进行最佳的信号检测。然而冷冻的PBMCs (特别是从储存的血液中制备的PBMCs) 在解冻后往往会聚集在一起，阻止了进一步的分析。核酸酶处理步骤有助于避免由死亡细胞释放的DNA导致的细胞聚集。                          

4、超活核酸酶在细胞解冻过程中,可以防止细胞结块。例如冷冻的PBMCs (特别是从储存的血液中制备的PBMCs) 在解冻后往往会聚集在一起,结块形成沉淀。经过超活核酸酶处理后,有助于避免由死亡细胞释放的DNA导致的细胞聚集现象的发生。                        

5、酶剪切是利用核酸酶将染色质酶切成小片段，可用于DNA结合蛋白的研究。酶促剪切不需要超声波处理设备。酶剪切也比超声更具侵略性，因此可以保护感兴趣的表位，使其能够被抗体识别。超活性核酸酶可用于代替样品超声处理或其他机械剪切处理DNA。

超活核酸酶最佳反应条件

       在50 mMTris-HCl缓冲液中含有1-2 mM MgCl2, 及在pH 8-9左右和37℃条件下,培育30分钟能取得最大DNA降解效果。超活核酸酶可以耐受相当高浓度的还原剂存在如DTT和变性剂尿素及盐酸胍等,从而维持良好的结构状态和进一步保持其超高的活性。因此超活核酸酶在比较宽泛,甚至是极端条件下继续发挥其DNA降解作用。

核酸酶溶液的制备

       在冻干粉的小瓶中加入去离子水,使溶液浓度达到0.2 kU to 1 kU/μL之间。用微量移液管吸取溶液并用移液管枪头贴着管壁缓慢释放, 冲洗粘附在在管壁上的核酸酶残留物。如果溶液量足够多,也可以盖住瓶盖, 轻轻晃动瓶子, 甚至颠倒小瓶几次,最后用离心机使溶液聚集在瓶底。根据需要,可以用缓冲液进一步稀释。

净化用样品处理

       通常在含有1克细胞的溶液中加入100-500U 的超活核酸酶。在细胞破碎前加入核酸酶效果更佳。在室温下摇动或轻轻旋转10-20分钟。根据需要, 可以进一步优化酶促反应,找到最佳酶和底物之间的比例。

生物分析用样品处理

       在超活核酸酶 (50U/100μl) 的存在下,将装有动物组织于缓冲液中的瓶子置于冰上进行超声处理。每15分钟重复一次。最后在750g和4℃温度下离心5分钟,去除残留碎片。

• Minnebio™超活核酸酶是什么？
  超活性核酸酶(EC：3.1.30.2)由粘质沙雷氏菌(Serratiamarcescens)分泌的、由两个大小为27.8 kD的单链聚合而成的二聚体。它是一种从大肠杆菌中表达和纯化的重组内切酶，它是一种非共价的同源二聚体。
• Minnebio™超活核酸酶产品描述？
  Minnebio™超活核酸酶(≥99%) (Minnebio™ Ultra-active Nuclease, ≥99%) 是一种来源于粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)的非特异性核酸内切酶，经基因工程改造在 Escherichia coli (E. coli)中表达，通过专利纯化过程，在GMP规范下制备超纯级广谱核酸酶。它可在链内任意核苷酸间进行切割，将核酸完全消化成3至5个碱基长度的5'-单磷酸寡核苷酸，能够在非常广泛的条件下 (6 M urea,0.1 M Guanidine HCl,0.4% Triton X-100,0.1% SDS,1 mM EDTA,1 mM PMSF) 降解各种形式的 (双链、单链、线状、环状、天然或变性) DNA和RNA，广泛用于去除生物制品中的核酸。
• Minnebio™超活核酸酶产品用途

  1、蛋白提取时去除核酸污染：超活核酸酶可用于处理细胞或组织的提取液,以降解生物样品中的DNA和RNA。

  2、细胞裂解液：在实验室环境下或者工业制造过程中,本品用于断裂DNA链,以减少由核酸特别是分子量较大的核酸分子导致的比较大的溶液粘度。

  3、样品分析：降解DNA和RNA消除它们对各种样品生物分析的干扰，用于生物分析的样品制备包括质谱、HPLC、ELISA、二维蛋白质电泳和印迹分析等。

  4、防止细胞结块：超活核酸酶在细胞解冻过程中,可以防止细胞结块。

  5、DNA打断：酶消化剪切是利用核酸酶将DNA酶切成小片段,可用于DNA结合蛋白的研究。

• Minnebio™超活核酸酶中英文同义词

  中文同义词：全能核酸酶/广谱核酸酶/活性核酸酶/超级核酸酶

  英文同义词：Benzonase Nuclease /Benzonase Endonuclease /TurboNuclease /Universal Nuclease/BenzNuclease

• Minnebio™超活核酸酶的优异特性

  (1)降解所有核酸：超活核酸酶能将所有形式的核酸 (DNA和RNA) 无差别切割成3-5个碱基的寡核苷酸碎片。

  (2)快速高效：超活核酸酶降解核酸的速度非常快，它比核酸酶DNaseI速度快15倍，且活性高出10倍。

  (3)高耐受性：超活核酸酶具有很高的稳定性。能抵抗还原剂DTT、蛋白质变性剂尿素和表面活性剂等对蛋白质结构的破坏作用，在极端条件下，仍然保持酶的活性，在比较宽泛的条件下降解底物。

  (4)抵抗酶的抑制剂的抑制作用：能抵抗DNase和RNase抑制剂对核酸酶活性的抑制作用。当其他核酸酶失活时，仍能发挥核酸降解作用。所有这些特性使得该产品成为在生物技术和制药领域中最受欢迎的核酸酶。

• Minnebio™超活核酸酶注意事项

  1、本产品仅作科研用途！本产品仅限于专业人员的科学研究用，请勿用于人体及动物的治疗、临床诊断或治疗、食品或药品、 化妆品、家庭用品的添加剂等用途，不得存放于普通住宅内。

  2、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

  3、具体使用时，需要注意纯度和内毒素水平对于后续分析检测的影响。

  4、参照最适范围和有效范围表格，若使用的溶液较为特殊，如为高盐溶液，或偏酸性、偏碱性，或含有较高浓度的去垢剂、变性剂等，应适当增加Minnebio™超活核酸酶的用量或孵育时间。

  5、含大量蛋白、细胞壁、其它盐分的粗制品 ，对该酶活性有部分抑制作用 ，使用时需要增加酶的用量。

  6、Mg2+是Minnebio™超级核酸酶的关键催化辅助因子，反应缓冲液含有1-2mM Mg2+对Minnebio™超级核酸酶的活性是必须的。