高压细胞破碎法
细胞破碎方式可规纳为机械法和非机械法两大类。细胞破壁的方法很多,按照是否存在外加作用力,可分为机械法和非机械法。按照物理和非物理方法可分为物理法和化学法。物理方法主要有:根据破壁温度可分为低温物理破壁,超低温物理破壁;根据用力情况可分为高速撞击破壁,剪切力破壁等,非物理方法主要有化学试剂法及生物酶解法。
物理破碎法的缺点是高能、高温、高噪音、高剪切力,易使产品变形失活;非专一性,胞内产物均释放,分离纯化困难;细胞碎片大小不一,难分离。化学破碎法缺点是费用高;引起新的污染,尤其是其他化学方法;一般只有有限的破碎,常需与其他物理法连用。酶解需要选择适宜的酶和酶系统,并要决定特定的反应条件,还常附加其他的处理,如辐照、加高浓度盐及EDTA,或者利用生物因素等促使微生物对酶解作用敏感,以获得一定的效果。
破碎方法选择的一般原则是提取产物在细胞质内,用机械法破碎;提取产物在细胞膜附近,用化学法;提取产物与细胞膜和细胞壁结合,可采用化学法和机械法结合的方法。选择合适的破碎方法需要考虑细胞的数量、目的产物对破碎条件(温度、化学试剂、酶等)的敏感性;破碎程度及破碎速度;细胞壁的坚韧长度;产物的性质如耐酸、耐热等。每一步应注意全面考虑操作度、对细胞的剪切程度、蛋白酶的失活作用等。
采用高压细胞破碎法,处理量大、破碎速度较快。细胞破碎是为目标产物的释放创造条件,为了最大程度的获得活性产物,而不是最终目的。此过程中只发生物质状态的变化,而无化学反应变化;是物质量的分配,而不是质的飞跃。高压细胞破碎仪通过高压破壁技术使物料在柱塞作用下进入可调节压力大小的阀组中经过特定宽度的限流缝隙均质区在均质阀内产生三种效应:空穴效应、撞击效应、剪切效应的机械作用力从而打破细胞壁的束缚达到高效率破碎细胞的效果。高压细胞破碎仪利用高压原理对细胞进行挤压破碎,使样品均匀并完全的碎裂,特别适用于厚壁细胞、较浓样品的破碎,具有无噪音、温升少、无金属离子污染等特点。采用高压细胞破碎法,处理量大、破碎速度较快。
高压细胞破碎仪是生物学研究中一种重要的实验、生产设备,能够快速、高效地将细胞破碎并释放其细胞内成分。它在蛋白质、DNA和RNA的提取等方面有着广泛的应用,并在微生物学和植物学等领域也发挥了作用。高压细胞破碎仪可以用于提取细胞内的蛋白质。在研究蛋白质功能和结构时,需要大量的纯化蛋白质来进行进一步的实验,可以将细胞破碎并将细胞内的蛋白质释放出来,为后续的纯化提供了便利;可用于提取其他细胞内的成分,如DNA和RNA。在遗传学研究中,需要提取DNA和RNA来进行分析和测序。可以快速地将细胞破碎并将DNA和RNA释放出来,为后续的实验操作提供了基础;可以用于生物学的其他研究领域,如微生物学和植物学。在微生物学中可以用于研究细菌、真菌和其他微生物的细胞壁结构和代谢产物。在植物学中可以用于提取植物细胞壁和细胞质分离出不同的细胞组分,以便进行更深入的研究。
高压细胞破碎优势
◆避免使用溶剂或化学品来破坏细胞壁
◆避免集中材料进一步昂贵的净化处理
◆确保产品高的品质保证
◆非常高效的生产流程,在保持高的产量的同时,能最大限度地从有价值地源头材料中获得收益
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