产品名称:PhD生产型高压细胞破碎仪
产品型号:D-100M
产品品牌:PhD
产品产地:美国
英文名称:PhD High Pressure Homogenizer
产品应用:乳液、分散体、细胞破壁、脂质体
产品原理
由电源(110V/220V/380V, 60/50 Hz) 驱动PhD高压均质机的一个或者多个泵柱塞做往复运动,物料在柱塞作用下进入可调节压力大小的阀组中经过特定宽度的限流缝隙均质区,瞬间失压的物料以极高的流速(1000-1500米/秒)喷出,在均质阀内产生三种效应:空穴效应、撞击效应、剪切效应。经过这三种效应相互作用处理过后,物料粒径可均匀细化到100nm以下,细胞破碎率大于97%。
产品参数
产品优势
应用背景
肠埃希氏菌(E. coli)通常称为大肠杆菌,是Escherich在1885年发现的,在相当长的一段时间内,一直被当作正常肠道菌群的组成部分,认为是非致病菌。直到20世纪中叶,才认识到一些特殊血清型的大肠杆菌对人和动物有病原性,尤其对婴儿和幼畜(禽),常引起严重腹泻和败血症,它是一种普通的原核生物,大肠杆菌属于细菌。
应用优势
大肠杆菌作为外源基因表达的宿主,遗传背景清楚,技术操作简单,培养条件简单,大规模发酵经济,倍受遗传工程专家的重视。目前大肠杆菌是应用最广泛,最成功的表达体系,常做高效表达的首选体系。大肠杆菌更适合原核基因的表达,外源基因表达产量与单位体积产量是正相相关的,而单位体积产量与细胞浓度和每个细胞平均表达产量呈正相相关。细胞浓度与生长速率,外源基因拷贝数和表达产物产量之间存在动态平衡,单个细胞的产量又与外源基因拷贝数,基因表达效率,表达产物的稳定性和细胞代谢负荷等因素有关。
应用案例
例如科学家们把人的胰岛素基因送到大肠杆菌的细胞里,基因重组E.coli细胞表达纯化,让胰岛素基因和大肠杆菌的遗传物质相结合。人的胰岛素基因在大肠杆菌的细胞里指挥着大肠杆菌生产出了人的胰岛素。并随着它的繁殖,胰岛素基因也一代代的传了下去,后代的大肠杆菌也能生产胰岛素了。这种带上了人工给予的新的遗传性状的细菌,被称为基因工程菌。
应用方案
通过高压细胞破碎仪使物料在柱塞作用下进入可调节压力大小的阀组中经过特定宽度的限流缝隙均质区在均质阀内产生三种效应:空穴效应、撞击效应、剪切效应的机械作用力从而打破细胞壁的束缚,把蛋白质从组织或细胞中释放出来尽可能保持原来的天然状态,不丧失活性,达到高效率破碎细胞的效果。即使用高压匀浆破碎法采用高压细胞破碎法,在细胞内产生的压力效应,从而能够有效地提取出蛋白质,且处理量大、破碎速度较快。这是一种机械处理细胞,物理抽提方法。
解决方案
首先富集菌体,收集胞内产物的细胞或菌体。然后进行细胞重悬,用适当的缓冲液或培养液将离心或沉降等方法得到的固体(沉淀、细胞、活性物质等等)重新悬浮。其次进行细胞破碎,使产物转移到液相中。最后收集含生化物质的液相,进行碎片分离,分离除去细胞、菌体、细胞碎片、蛋白质的沉淀物和絮凝体等固体悬浮物,得到上清液或滤液。然后从澄清的滤液中提取胞内产物,从细胞裂解物中获取目标产物。
PhD优势
原核表达系统是基因表达技术中发展最早,应用最广泛的蛋白表达系统之一。近几十年,大肠杆菌表达系统也不断得到发展和完善,被科研及工业用户大量用于各种重组蛋白表达。市面上的重组蛋白有30%是由大肠杆菌表达系统生产而来,是小分子细胞质蛋白或结构域表达的首选宿主。在大肠杆菌表达系统中表达的外源基因包括原核基因和真核基因;原核基因可以直接在大肠杆菌中表达出来,真核基因含有内含子,大肠杆菌不能对mRNA进行剪切形成成熟的mRNA,因此,真核基因一般以cDNA构建表达载体在大肠杆菌系统中表达。
◆破壁能力:高压设计,轻松上压;均质效率高,工艺稳定;稳定的破碎能力,更高的胞内物提取;纯机械破碎,无化学污染;可放大工业化生产工艺设备
◆控温效果:独特温控设计,内置和外置双向控温,确保均质过程及出料温度可控。
◆活性保障:循环的控温系统,蛋白活性不失活,细胞破碎后,活性保值高达99%
◆无菌保障:金属结构连接,没有O型圈或垫片,无死角设计;在线排空结构设计;所有机型均可实现在线清洗(CIP)、循环清洗、拆装清洗、在位灭菌(SIP)
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