高压细胞破碎仪D-6L
产品概述: D-6L机型每小时的流量为6升/小时,最高30000Psi的样品处理压力。属于实验型的设备,为样品量小的研发提供了选择。D-6L型高压均质机试料残余量低,可根据需求配置样品控温设备,料液通道采用金属连接结构,无橡塑等密封件,全程符合cGMP操作要求。

产品名称:PhD实验型高压细胞破碎仪

产品型号:D-6L

产品品牌:PhD

产品产地:美国

英文名称:PhD High Pressure Homogenizer

产品应用:乳液、分散体、细胞破壁、脂质体


产品原理

由电源(110V/220V/380V, 60/50 Hz) 驱动PhD高压均质机的一个或者多个泵柱塞做往复运动,物料在柱塞作用下进入可调节压力大小的阀组中经过特定宽度的限流缝隙均质区,瞬间失压的物料以极高的流速(1000-1500米/秒)喷出,在均质阀内产生三种效应:空穴效应、撞击效应、剪切效应。经过这三种效应相互作用处理过后,物料粒径可均匀细化到100nm以下,细胞破碎率大于97%。

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产品参数


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产品优势


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应用背景

又称昆虫杆状病毒系统(Baculovirus expression vector system,BEVS),属于真核细胞表达系统,更接近哺乳动物细胞的表达系统,但不同于酵母和哺乳动物细胞表达系统。昆虫表达系统凭借其稳定的实验体系、高表达水平及翻译后修饰功能而被普遍认可为一种表达大规模蛋白的强有力的工具,可以提供高活性的重组蛋白,解决在其它体系中无法解决的蛋白活性困难。


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应用优势

昆虫表达系统由于其具有高效的表达能力,通过BEVS得到的重组病毒易于筛选、具有翻译后修饰功能、表达外源基因的效率较高。BEVS还可以同时表达多个外源基因,在分泌蛋白生物活性的同时增加产量。因此,BEVS在科研和工业生产中通常应用于大规模重组蛋白的制备。应用的菌株有sf9、sf21、High-5等。


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应用案例

昆虫表达系统相比其他表达系统,具有大蛋白正确折叠、具有真核翻译后修饰、毒性蛋白可被表达等特点,适用于病毒疫苗、信号分子、细胞因子、激酶等。用于生产具有哺乳动物细胞末端唾液酸化修饰的N糖蛋白。通过转座作用将转移载体中的表达组件定点转座到能在大肠杆菌中繁殖的杆状病毒穿梭载体上,通过抗性和蓝白斑筛选到重组穿梭质粒,提取穿梭质粒DNA转染昆虫细胞后,得到的子代病毒即为重组病毒。将病毒上清浸染昆虫细胞,获得表达的重组蛋白。


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应用方案

通过高压细胞破碎仪使物料在柱塞作用下进入可调节压力大小的阀组中经过特定宽度的限流缝隙均质区在均质阀内产生三种效应空穴效应、撞击效应、剪切效应的机械作用力从而打破细胞壁的束缚,把蛋白质从组织或细胞中释放出来尽可能保持原来的天然状态,不丧失活性,达到高效率破碎细胞的效果。即使用高压匀浆破碎法采用高压细胞破碎法,在细胞内产生的压力效应,从而能够有效地提取出蛋白质,且处理量大、破碎速度较快。这是一种机械处理细胞,物理抽提方法。


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解决方案

首先富集菌体,收集胞内产物的细胞或菌体。然后进行细胞重悬,用适当的缓冲液或培养液将离心或沉降等方法得到的固体(沉淀、细胞、活性物质等等)重新悬浮。其次进行细胞破碎,使产物转移到液相中。最后收集含生化物质的液相,进行碎片分离,分离除去细胞、菌体、细胞碎片、蛋白质的沉淀物和絮凝体等固体悬浮物,得到上清液或滤液。然后从澄清的滤液中提取胞内产物,从细胞裂解物中获取目标产物。


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PhD优势

胞内表达的优点是表达量高,糖基化程度很低或无糖基化,由于是在胞内进行表达,因此对培养基及发酵条件要求不高,不易造成蛋白质的降解,并且胞内表达的重组蛋白具有良好的活性和生物安全性,更容易实现高密度发酵表达目的蛋白等,尤其是针对需要表达且不会过糖基化且有生物活性的异源蛋白,采用胞内表达更为合适,但是胞内表达需要对细胞进行破碎才可以收集产物。采用高压细胞破碎法,在细胞内产生的压力效应,从而能够有效地提取出蛋白质,且处理量大、破碎速度较快。这是一种机械处理细胞,物理抽提方法。

◆破壁能力:高压设计,轻松上压;均质效率高,工艺稳定;稳定的破碎能力,更高的胞内物提取;纯机械破碎,无化学污染;可放大工业化生产工艺设备

◆控温效果:独特温控设计,内置和外置双向控温,确保均质过程及出料温度可控。

◆活性保障:循环的控温系统,蛋白活性不失活,细胞破碎后,活性保值高达99%                                                                 

◆无菌保障:金属结构连接,没有O型圈或垫片,无死角设计;在线排空结构设计;所有机型均可实现在线清洗(CIP)、循环清洗、拆装清洗、在位灭菌(SIP)


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